优秀的qPCR引物对的特征。PCR产物大小：70200bp要注意的qPCR引物对的主要特征之一是将创建的产品的大小，建议设计能产生70-200bp产物的引物，产品尺寸过大(u003e200bp)会降低qPCR引物的引物效率，而产品尺寸过小(70bp)会使它们难以与污染的引物二聚体形成区分开来，建议以150bp左右的产品大小为目标。

理想情况下，每个引物的长度应为18-22bp通常20bp是一个常见的选择。太小的qPCR引物(u003c18bp)会增加它与基因组其他地方结合的可能性，即它对感兴趣的目标不够特异。否则，太大的qPCR引物(u003e22bp)会提高引物熔化温度(Tm)，这将影响反应的退火温度和引物结合特性。Tm：5965Tm是良好qPCR引物对的另一个重要特征。

做qpcr的mrna长度约为100nt左右。实时荧光定量PCR（qPCR），是利用荧光信号的变化实时检测PCR扩增反应中每一个循环扩增产物量的变化，从而对起始模板进行定量及定性分析的一项技术。qPCR引物的好坏会直接影响到实验结果，所以引物设计是整个实验中非常关键的一步。nt是指核酸分子，不同的mRNA长度不同，包括的核酸分子也不同，而且差别很大，所以很难回答你。

20220316引物设计及在线验证你设计的引物是否有用?在做实验之前可以做一个电子PCRqPCR引物设计 在线验证方法一:NCBI上probe1.之前NCBI上有一个probe选项可以直接设计引物,上面会给出上下游序列。比如搜索小鼠nanog基因,它给出了这样的两条引物:上游引物:TTGCTTACAAGGGTCTGCTACT下游引物:ACTGGTAGAAGAATCAGGGCT方法二:Primer3web参考:Primer3web在线引物设计2分钟学会步骤极简的引物设计!哔哩哔哩()2.1.寻找基因序列以humanp53为例进行引物设计。

qpcr和普通的PCR是一样的，需要buffer，dNTP，taq酶，引物，模板，水等qpcr试剂盒是将buffer，dNTP，taq酶混在一起，还需要引物和模板。如需设计引物，可以添加为青生物公众号，由专业人员提供免费的荧光定量PCR引物设计服务。